实验目的：观察影响尿生成的各种因素，并分析其作用机制。实验原理：尿生成的过程包括肾小球的滤过、肾小管和集合管的重吸收和分泌。肾小球滤过受滤过膜的面积和通透性、血浆胶体渗透压、肾小球血浆流量和肾小球毛细血管压等因素的影响，后二者又受肾交感神经以及肾上腺素和去甲肾上腺素等体液因子的影响，肾小管重吸收受小管液中溶质浓度等因素的影响。此外，影响尿液浓缩和稀释机制的因素，影响抗利尿激素释放的因素，影响肾素-血管紧张素-醛固酮系统的因素以及循环血量、全身动脉血压等都能对尿生成产生影响。实验动物：家兔实验器材和用品：PowerLab8S主机，记滴器，哺乳类动物手术器械，兔板，细塑料管，棉线，手术灯，纱布，班氏试剂，试管，试管夹，滴管，水浴槽，1％戊巴比妥钠溶液，20%葡萄糖溶液，1:10,去甲肾上腺素，10%NaOH溶液，0.6%酚红溶液，垂体后叶素，速尿，生理盐水。实验步骤：1.动物准备：⑴.家兔的捉持、称重和麻醉：家兔的捉持和称重方法参见P12动物的捉持和称重。以1%戊巴比妥钠溶液每公斤体重3ml，从远离耳根部位的耳缘静脉中缓慢注射，麻醉家兔。注射时密切观察家兔的呼吸、心跳、肌张力和角膜反射等，以防麻醉过深而死亡。麻醉后，家兔仰卧于兔板上，四肢和门牙用绳子固定。注意下腹部必须放正拉直，以利于手术。⑵.下腹部手术：剪去下腹部手术野的兔毛，剪下的兔毛应及时放入盛水的杯中浸湿，以免到处飞扬。在耻骨联合上缘沿正中线向上作5cm长的皮肤切口，用止血钳逐层分离皮下组织和肌肉。沿腹白线切开，暴露腹腔，将膀胱轻轻向外向下拉出，暴露膀胱三角，仔细辨认输尿管，并将一侧输尿管与周围组织轻轻分离，避免出血。用棉线将输尿管近膀胱端结扎，在结扎线的上部用眼科小剪刀剪一斜口，切口约为管径的一半，把充满生理盐水的细塑料管经输尿管的斜口向肾脏方向的输尿管插入，用线结扎固定，进行导尿，可看到尿液随着输尿管的蠕动间断性地从细塑料管中逐滴流出（注意：塑料管插入输尿管管腔内，不要插入管壁肌层与粘膜之间，插管方向应与输尿管方向一致，勿使输尿管扭曲，避免尿液流出不畅）。手术完毕后用38℃左右的生理盐水纱布在腹部切口处遮盖，以保持腹腔内温度并避免体内水分的过度流失。将细塑料管引至兔板边缘，使尿液直接滴在记滴器的金属电极上。2．按照图3-26连接PowerLab主机、桥式放大器和计滴器等设备。

3．启动计算机，打开PowerLab主机电源，在桌面上单击Chart4forwindows图标，进入Chart应用程序窗口。4．选择采样速度为1K/s，显示比例为20:1。5．用鼠标左键单击菜单栏的Setup，选取Channelsettings选项，在通道设置对话框中对通道数目、名称、幅度范围进行设置（参见P37通道的设置）。把通道数设置为1，按OK钮保存设置并退出该对话框。6．Channel1显示区域显示尿滴的累积滴数。设置方法参见P40即时数据统计的设置。单击Channel1的通道功能按钮▼，选取ComputedInput…。Rawdatainput选择通道1，Function功能选项选取Counter，Range设置为2k，显示为连续记数（若超过范围，重新单击Start/Stop按钮开始记数）。7．在实验中，每次注射药物时,可单击加注工具条的Add按钮，打上标注，以利于实验结束后数据的统计和分析。加标注的方法参见P42记录过程中加上注解。8．数据的测量和读取：以读取加药后一分钟的尿量为例，在采样结束后，将测量标记Ｍ▼移到加药起始处，然后移动鼠标直至右上角的时间读数为△=60s处，读取Channel1右侧的幅值读数，此读数即为加药后一分钟的尿量。用同样的方法可读取加药后第二分钟及第三分钟内的尿量。测量方法参见P46实验数据的计算、分析和统计。观察项目:1．待尿流量稳定后，即可进行下列实验项目，每项实验开始时，都应先记录一分钟尿量作为对照，然后分别进行注射各种药品，观察和记录三分钟内尿量的变化（注意：记录注射药物后头三分钟内每一分钟的尿量，而不是三分钟累计尿量）。单击Start/Stop切换按钮开始采样，数据记录方法参见P41实验数据的记录。2．从耳缘静脉迅速注射37℃的生理盐水20ml，记录尿量的变化。3．从耳缘静脉注射1:10,去甲肾上腺素0.1~0.2ml，记录尿量的变化。4．先收集尿液2滴进行尿糖定性试验［注］作为对照；然后由耳缘静脉注射20%葡萄糖溶液5ml，记录尿量的变化。在尿量明显增多时，再取尿液2滴作尿糖定性试验。5．自耳缘静脉注射0.6%酚红溶液0.5ml，用盛有10％Na0H溶液的小杯子盛接尿液如果尿液中有酚红排出时，遇NaOH溶液即呈现红色。记录从开始注射酚红到尿中排出酚红所需要的时间(此观察项目不需记录尿量)。6．从静脉注射垂体后叶素2单位。记录尿量的变化。4．从耳缘静脉注射速尿（5mg/kg），记录注射速尿前后的尿量变化。速尿注射后起效慢，一般待出现明显效果时，才开始计数三分钟尿量。5．待各项实验步骤完成后，单击Start/Stop切换按钮停止记录。测量和读取各项实验步骤中的尿量，测量方法参见P46实验数据的计算、分析和统计。注意事项：1．实验中需多次进行静脉注射，应注意保护兔的耳缘静脉，注射时应从远离耳根部位开始。亦可在实验开始前，从耳缘静脉进行静脉滴注，以后每次注射药物可从静脉滴注管注入。2．输尿管插管时，注意不要插入其粘膜层，并避免反复插管而损伤粘膜面造成出血，以致血液凝固堵塞输尿管。3．输尿管插管不能扭曲，应顺着输尿管走向，以免引流不畅。[注]:尿糖定性试验的方法：在试管内盛1ml的班氏试剂，加入尿液2滴，将试管放在水浴中加热（在加热煮沸过程中应不断振荡，防止液体溢出管外），冷却后观察溶液和沉淀物的颜色，若试液由蓝色转为绿色、黄色或砖红色，表示尿糖定性试验阳性（绿色+，绿黄色++，黄色+++，砖红色++++），若溶液仍为蓝色则为尿糖定性试验阴性（-）。思考题：从耳缘静脉注射速尿和注射5ml20%葡萄糖溶液，会对尿量产生什么影响，作用机理有何不同，为什么？

转载请注明：http://www.wiwuh.com/lczz/907869.html